Опыт формирования ремонтно-маточного стада стерляди


Работы по выращиванию стерляди в прудах как добавочного объекта к карпу широко известны. Практически все вопросы выращивания стерляди в индустриальных условиях являются новыми как в отечественном, так и в зарубежном рыбоводстве.


В нашей стране разработана технология выращивания стерляди в садках (Михеев, 1982). Производителей стерляди для садковых хозяйств получают в местах ее промысла. Для дальнейшего выращивания производителей стерляди в садках следует отбирать здоровых особей без травм и повреждений. После перевозки стерлядь сразу помещают в садки (Львов, 1973; 1976; Михеев, 1982).
в первое время стерлядь, завезенная из маточных водоемов, обычно не потребляет искусственные корма, а питается личинками насекомых, червями и другими живыми кормами, к которым она привыкла в естественных условиях. Однако в связи с трудностью обеспечения живым кормом стерлядь приходится кормить искусственными продуктами. Поэтому в последние годы используют методику ее приучения к искусственным кормам.
в течение всего года производителей стерляди содержат в садках. Плотность посадки летом должна составлять 1,5-3 кг/м?. Рыбу кормят 1-3 раза в сутки из расчета 3–5 % от ее массы. Наиболее охотно стерлядь потребляет влажные гранулированные корма на основе малоценной рыбы. Производители стерляди, хорошо поедающие в садках искусственный корм, отличаются высокой выживаемостью: летом она составляет 90-100 %.
Производители в садках обычно растут медленно: относительные Годовые приросты составляют 10-20 %. Созревание в садках взрослой рыбы, завезенной из маточных водоемов, обычно начинается не более чем через 2-3 года после завоза, за этот период происходит адаптация к новым условиям содержания. Самцы хорошо и довольно дружно созревакут в садках. Созревание самок происходит с интервалом 1-2 года.
Конечная плотность ремонта и производителей стерляди в летних садках не должна превышать 9-10 кг/м?, в зимних – 10-20 кг/м?. Обычно за летний период индивидуальная масса производителей увеличивается на 20–30 %. В течение зимы и весны происходит уменьшение массы тела на 12-17 %.
Плодовитость садковой стерляди массой 600-1000 г составляет 15-30 тыс. икринок, относительная плодовитость - 20–30 икринок на 1 г массы (Львов, 1973; 1976).
При проведении опытов по выращиванию стерляди в зимних прудах установлена высокая выживаемость и пластичность этого объекта. Показано, то стерлядь в зимний период питается и отличает ся высокой зимостойкостью, а также дает прирост сут 40 ги более при отходе 0,9 %, т.е. в сравнении с другими видами осетровых количество погибших рыб незначительно (Суховерхов и др., 2002).
Работы с Донской стерлядью начали проводить на Донском осетровом рыбоводном заводе в конце 1990-х гг. Для восстановления популяции донской стерляди было необходимо сформировать маточное стадо. В настоящее время сформировано небольшое маточное стадо Донской стерляди, которое содержится в условиях осетрового рыбоводного завода. Его выращивание проводилось в бассейнах на искусственных комбикормах (Абросимова, Лобзакова, 2004; Говорунова, 2004).
На Волгоградском осетровом рыбоводном заводе также проведены исследования по формированию ремонтно-маточного стала волжской стерляди, заготовленной в естественных условиях. Специалистами разработаны технологические методы нырцимания стерляди в прямоточном и замкнутом режиме, а также специальные влажные комбикорма для ремонтно-маточного стада (Сыбулов, 2005).
Однако следует отметить, что работы, связанные с формированием маточных стад стерляди, требуют новых подходов и современных методов, а также отработки четкой технологии содержания ремонтноматочного стада в индустриальных условиях.
Формирование ремонтно-маточного стала стерляли на научно-экспериментальной базе «Кагальник» в условиях УЗВ было начато в 2005 г. Для создания ремонтно-маточного стада использовали молодь стерляди Донской популяции (средняя масса 3 г, длина 7 см), которая была завезена с Донского осетрового рыбоводного завода 15.06.2005. До середины июля (20.07.2005) стерлядь выращивали в одном бассейне размером 1x1 x 0,5 м. В октябре Донская стерлядь была перссажена в бассейн площадью 2 м? (УЗВ).
Мы провели эксперименты По выращиванию ремонтно-маточного материала в зимний период, Стерлядь, один из самых тугорослых видов среди осетровых рыб, отличалась высокими показателями роста в зимний период при стабилизации температурного режима.

Показатели красной крови допской стерляди в период зимовки в общем находились в пределах нормы, отмечалось лишь 11екоторое их снижение (табл. 23). Содержание белка в сыворотке крови было на высоком уровне: 42 тўл в декабре и 38 г/л – в марте. Результаты исследований показателей крови свидетельствуют об удовлетворительном физиологическом состоянии выращиваемых рыб.
Таблица 23 Показатели красной крови донской стерляди в период зимнего выращивания

Показатели красной крови донской стерляди в период


Переход производителей стерляди в нерестовое состояние происходит при температуре Воды 10-11 с. При зимнем се/сжании с оптимизацие параметров среды он наступает примерно на 1,5-2 месяца раньше.
Для сравнительный характеристики ремонтно-маточного стада в марте были завезены годовики Волжской стерляди с НПП «БИОС». После зимнего содержания они отставали о массе у донской стерляди, которую в зимний период подкармливали. Показатели красной крови головикон стерляди Волжской и донецкой популяции представлены в таблице 24.
Увеличение всех показателей красной крови у двух исследованных групп стерляди происходило с мая по апрель. Низкий уровень гемоглобина у волжской стерляди отмечен в мас – 57,1 г/л, это связано с тем, что рыба прошла зимовку и была несколько ослаблена после транспортировки. Однако уже к иню уровень гемоглобина у волжской стерляди повысился и достиг 71,0 г/л, у Донской стерляди высокий уровень гемоглобина наблюдался в течение всего периода исследований.


Гематокрит увеличивался кмере роста рыбы. Если в мае его величина у Волжской стерляди составляла 0,16-0.19 л/л, у доской — 0,24 л/л, то в конце июня - 0,21 и 0.25 л/л соответственно.
Концентрация гемоглобина у исследованных объектов изменялась с увеличением количества эритроцитов. Среднее содержание гемоглобина в одном эритроците было выне у доской стерляди, к концу лета мы отметили его увеличение. Показатели содержания сывороточного белка у двух исследуемых групп были в пределах нормы для (хстүнных рыб. Однако у волжской стерляди в мае содержание белка составляло 15 гл, что в 2,5 рази ниже, чем у Донской стерляди (рис. 148). Низкие показатели савјуточнюто белка также связаны с выходом волжской стерг151:4и из состояния зимонки. В дальнейшем II 10 повышение этого показателя, ик илю содержание белка у двух исследоваіlных видов было почти на одинаковом уровне.
Показатели крови полностью подтвердили удовлетворительные усл Bня содержания и выращивания двух груІІ стерляди.
Следует отметить, что уже в апреле 2007 г. можно было выделить из стала Донской и волжской стерляди созревших самцов. Впервые старли 5 самцов волжской стерляди и 6 самцов донскоі стерляди. Осенью козчHчестік» самцов у двух исследованных нуляции составило около 15 %.
Для сравнительных исследований, связанных с особенностями формирования маточных стад разных подвидов стерляди, использовались про изводители Волжской стерлян.
Первую партию производителей Волжской стерляди в количество 100 экз. (3 самки и 7 самцов) завезли в ноябре с Волгоградского госстрото го завода, он были вы OBICпы на естественных

Содержание белка в сыворотке крови стерляди

Рис. 148, Содержание белка в сыворотке крови стерляди
условий (р. Волга) при осенней заготовке. Самки содержались в бассейнах 2 х 2 м при температуре 9,5–10,4 с без кормления. Содержание кислорода в воде находилось в пределах нормы и составило 7,7-8,5 г/. В декабре (01.12.2006) самки были протестированы для определения степени зрелости половых продуктов (рис. 149).
Использование щуповых проб позволило определить коэффициент поляризации ооцитов (таблица 25, рис. 150, 151).


Самки и самцы содержались совместно в бассейне размером 2 х 2 м, после взятия проб щупом самцы в количестве 7 экз. были отсажены в отдельный бассейн. Поведение рыб в бассейнах было характерно для данного вида рыб. Все особи держались преимущественно на течении у дна.
Суть нашего эксперимента состояла в стимулировании раннего созревания производителей стерляди. В естественных условиях стерлядь созревает в конце апреля — начале мая. В задачу исследований входило получение половых продукТОВ на несколько месяцев раньше.

Производители содержались в бассейiнах до февраля при средней температуре 7-8 °С. За две недели до переста начали Поднимать температуру воды на один градус в сутки и довели се до 15 "C. При такой температуре производителей содержали в течение недели. Перед нерестом самок повторно протестировали, коэффициент поляризации составил 7,5 8,0 %, что свидетельствовало о начале перехода яичников в V стадию зрелости (стадия текучих половых продуктов) (рис. 152).

Зрелые яйцеклетки стерляди, полученные методом подрезания яйцевода

Рис. 152, Зрелые яйцеклетки стерляди, полученные методом подрезания яйцевода
Дополнительно для подготовки производителей стерляди к нересту использовали биологически активные вещества, аскорбиновую кислоту, а-токоферол и В, которые вводили в виде инъекций по специальной схеме за месяц до нереста.

При подготовке стерляди к нересту с применением комплекса витаминов С, Е и В., использовали фармацевтические препараты раствора 10 %-ной аскорбиновой кислоты (100 мг/мл), 30 %-ного а-токоферол-ацетата (300 мг/мл) и цианокобаламина (500 мкг/мл). Нормы введения аскорбиновой кислоты иа-токоферол-ацетата для производителей осетровых рыб были разработаны ранее (Сорокина, 2004). Витамин Е относится к группе жирорастворимых витаминов, поэтому перед введением ампулу с препаратом разогрева ли на водяной бане. Витамин Bвводили на следующий день после инъецирования витаминами E и C. (Пономарев и др., 2005а)
Витамины вводили медицинским шприцем объемом 5 см в спинную мышцу на уровне третьей жучки. Для каждого препарата использовали индивидуальный шприц. Дозы инъекций составили: витамин С- 10 мг/кг, витамин Е – 15 мг/кг (Coрокина, 2004), витамин By – 50 мкг/кг массы тела рыбы. Контрольной группой служили производители, инъецированные витаминами С и Е. Перед помещением на инкубацию обработку икры русского осетра проводили цианокобаламином в период обесклеивания в апаратах АОИ в течение 45 минут. (Пономарева и др., 2005б, Храмова и др., 2005в; 20056).
Действие витаминных инъекций и обработки икры цианокобаламином определяли на основани данных созревания производителей, процента оплодотворения икры, а также выживаемости эмбрионов, личинок н выхода молоди. Плодови тость самок определяли общепринятым способом (Правдин, 1966). Для определения процента оплодотворения икры брали пробы на стадии второго деления - 4 бластомера, стадия 5 (Детлаф, Гинзбург, 1981).
Для стимулирования самок и самцов стерляди использовали гипофизарную вытяжку, которую вводили из расчета на единицу массы рыбы (табл. 26). Самцам гипофизарную инжекцию делали раньше, чем самкам. После инъекции самок лучше размещать в бассейнах с проточной водой, имеющих светлое дно,
Самцы стерляди созрели через 24 часа. Активность от сцеженной спермы составила 4-5 баллов по шкале Персова (Персон, 1953), у самок в это время отмечено покраснение анального отверстия. Самки начали созревать через 28 часов, что было установлено визуально по отдельным икринкам, рассеянным по дну бассейна, или путем осторож Пого от сцеживания малых порций икры, для чего осмотр самок проводили каждые 1,5-2 ч.
Таблица 26 Расчетные дозировки гипофизарного препарата для производителей стерляди в зависимости от массы тела

Расчетные дозировки гипофизарного препарата для производителей стерляди в зависимости от массы тела

индивидуальный шприц. Дохзы инъекций составили: витамин С- 10 мг/кг, витамин Е – 15 мг/кг (Coрокина, 2004), витамин By – 50 мкг/кг массы тела рыбы. Контрольной группой служили производители, инъецированные витаминами Си Е. Перед помещением на инкубацию обработку икры русского осетра проводили цианокобаламином в период обесклеивания в апаратах АОИ в течение 45 минут. (Пономарева и др., 2005б, Храмова и др., 2005в; 20056).
Действие витаминных инъекций и обработки икры пианокобаламином определяли на основании данных созревания производителей, процента оплодотворения икры, а также выживаемости эмбрионов, личинок н выхода молоди. Плодови тость самок определяли общепринятым способом (Правдин, 1966). Для определения процента оплодотворения икры брали пробы на стадии второго делення - 4 бластомера, стадия 5 (Детлаф, Гинзбург, 1981).

котбору икры у самок стерляди приступали лишь после того, как было установлено, что при легком нажатии на брюшко икра свободно вытекает, Самку извлекали из воды, насухо вытирали полотенцем, затем заворачивали в него и брюшком кверху помещали в подставку на столе. Во время отбора икры жабры рыб через каждые 1-1,5 мин смачивали водой.
Получение икры осущССТВЛЯЛи методом подрезания яйцевода (Подушка, 19865). В среднем от каждой самки было получено 155-250 г икры, что характерно для впервые нерестующих самок (табл. 27). Средняя масса икринки колебалась от 6,4 до 8,2 мг, диаметр 2,3 мм. После взятия икры самкам были введены антибиотики (гентамицин) для исключения попадания инфекци после операции.
Таблица 27 Рыбно-биологические показатели самок Волжской стерляди

Рыбно-биологические показатели самок Волжской стерляди

После осеменения икру обесклеивали сиспользованием талька в течение 45 минут, а затем закладывали на инкубацию. Инкубацию проводили в аппаратах «Осетр», Вкладыши которых были установлены непосредственно в бассейн, при температуре воды 17 °С. Процент оплодотворения составил 90 %. Инкубация длилась 5 суток. в период инкубации проводили обработку икры фиолетовым к из расчета 0,2 мг/л.
Вторая партия производителей волжской стерляди была подготовлена к нересту при естественных температурах. Самок протестировали 11 апреля при температуре воды 12 "C. Коэффициент поляризации составил 12–13 %, стадия зрелости яичников IV. Через две недели после поднятия температуры воды до 15 с у самок повторно взяли пробы для определения стадии зрелости и готовности к нересту. 13 мая самкам и самцам сделали гипофизарные инъекции для стимулирования нереста, созревание производителей наступило через 24-28 часов (табл. 28).
Икра была заложена на инкубацию, и через 5 суток при температуре 19 °C произошло вылупление единичных экземпляров, средняя масса личинок составила 8,2 мг (рис. 153, 154).

Таблица 28 Рыбоводно-биологические показатели самок волжской стерляди, созревших при естественных температурах

 Рыбоводно-биологические показатели самок волжской стерляди, созревших при естественных температурах

Рис. 153. Вылупившаяся личинка стерляди (возраст 1 сутки, масса 8 мг)

Рис. 154. Личинка стерляди при переходе на активное питание (мкзраст 12 суток, масса 15 мг, длина 16 мм)
Было установлено, что регулирование температуры перед нерестом позволяет сдвинуть сроки созревания ооцитов у самок и получить качественное потомство в более ранние сроки.
Исследования с использование витаминного препарата в для производителей стерляди в преднерестовый период показали его крихктивность Результаты представлены в таблице 29. Число ответивших на гипофизарную инъекцию рыб увеличилось на 10 % по сравнению с контролем и составило 100 %. Количество ослодотворенной икры выросло на 17 %.
При дальнейшем наблюдении выявили повышение количества нормально развивающейся

Таблица 29 Показатели самок стерляди при введеннн цианокобаламина

Показатели самок стерляди при введеннн цианокобаламина

икры на стадии маленькой желточной пробки (17 ст.): в опытном варианте – на 15 %, на стадии вылупления эмбрионов из оболочек (36 ст.) – на 17 % по сравнению с контролем. По литературным данным, введение витамина В., производителям в процессе получения потомства на стадии предварительного инъецирования самок гипофизом повышает выход трехдневных личинок карпа, пестрого и белого толстолобиков, снижает после нерестовую гибель производителей этих видов рыб (Духовенко, Сергеева, 1996).
После сравнительного изучения и анализа мрефективности применения цианокобаламина для повышения рыбоводного качества производителей было необходимо выяснить его действие на общий химический состав икры, поскольку он может оказывать значительное влияние как на оплодотворяемость икры, так и на выживаемость зародышей и их дальнейшее развитие (Вассель, 2004). Биохимический анализ показал, что икра опытной группы отличалась более высоким содержанием протеина (на 2,3 %) и липидов (на 1,1 %) (табл. 30).
Высокая концентрация липидов является свидетельством того, что их расход в организме был
значительно ниже. Очевидно, в преднерестовый период содержания у контрольных самок происходили значительные затраты липидных веществ на генеративный синтез и поддержание жизненных функций.
Через неделю после введения цианокобаламина улучшилось состояние производителей, количество гемоглобина выросло на 10 %, сывороточный белок в среднем на 15 % (рис. 155, 156). Изменилась лейкоцитарная формула. Если перед Введением витамина В, производителям наблюдалось повышенное содержание моноцитов, то после их количество снизилось, что свидетельствует об усилении защитных функций организма под действием цианокобаламина (Житенева и др., 1989).

Результаты инкубации икры, полученной от самок стерляди, которым вводили витамин В. Показали, что в сравнении с контрольной группой число созревних рыб в этой группе увеличилось на 16 %, количество оплодотворенной икры — на 10 % (табл. 31).


Таким образом, введение 50 мкг/кг цианокобаламина самкам осетровых рыб в преднерестовый период перед проведением гипофизарных инъекций значительно повышает их рыбоводнобиологические характеристики. При этом количество созревших самок увеличивается на 10-40 %, а оплодотворенной икры — на 10-17 %, выход свободных эмбрионов – на 20 %.

Уровень гемоглобина в крови самок, инъенированных нитамином

Рис. 155. Уровень гемоглобина в крови самок, инъекцированных витамином в12

Рис. 156. Уровень сывороточного белка в крови самок, инъецированных витамином В.

Таблица 31 Показатели самок стерляди, инъецированных 

Показатели самок стерляди, инъецированных пиано

В период эмбрионального развития определяли количество нормально развивающихся заро дышей. За время инкубации в опытом варианте, где икра была обработана 1,0 мг/л цианокобаламина, было отмечено снижение нарушений в развитии в среднем на 10 % (табл. 32).


Во время просмотра проб в эмбриогенезе встречались различные нарушения в развитии эмбрионов, в частности, ооциты с беспорядочным дроблением, у которых борозды закладывались не одновременно, большая область в ооците совсем не дробилась. Границ клеток практически не было видно, а зародыш приобрел белесую с разводами (мраморную) окраску. Такие эмбрионы никогда не переходят к гаструляции и медленно погибают. Эги нарушения являются следствием партеногенетического дробления (Детлаф и др., 1981).
Табла 32 Нарушения в развитии эмбрионон, %

Нарушения в развитии эмбрионон, %

Р< 0,05; • Р<0,01; • р<0,001.
Другой вид нарушения в развитии - недоразвитие борозд дробления, появление лишних борозд. например, отмечены эмбрионы, у которых пять бластомеров вместо четырех. Встречались также яйца с выделившимся в центре бластомером. Некоторые борозды дробления на концах имели раздвоения в виде вилочек. Это приводит к тому, что бластомеры не участвуют в дальнейшем развитии. По данным Т.А. Детлаф и др. (1981), такие нарушения дробления происходят при резких перепадах температуры во время инкубации. Нарушения процесса дроблення в опытной группе составили 2,4 %, что в 2 раза ниже, чем в контрольной.
В конце этапа гаструляции чаще всего встречались аномалии, возникающие в результате нарушения клеточных перемещений (Щепковски, Кольман, 2002). Во время инкубации икры русского осетра нарушения принцесса гаструляции выражались в увеличении размера желточной пробки по сравнению с нормально развивающимися икринками (в опыте – 1,0 %, в контроле – 1,8 %), в этом случае обрастание темных вегетативных клеток задерживается и зароды переходит к следующему периоду, сохраняя желточную пробку значительного размера. В дальнейшем у него будут наблюдаться те или иные нарушения строения.
При исследовании приб икры на стадиях после гаструляции наблюдали неправильное строение го Ловы (в опыте – 2,5 %, в контроле – 5,8 %), отмечали Неправильную форму желточного мека и отсут ствие переднего отдела тела (единичные эмбрионы).
На стадии прелличинки были обнаружены наупления в строении тела. Среди них нарушения пропорций тела, развитие искривлений, укорачивание усиков, жаберных крышек. В основном встречались пpeдличинки с искривленным телом (в опыте – 3,0 %, в контроле — 5,3 %).
Все вышеописанные нарушения могут быть следствием неправильного созревания ооцитов, что ведет к снижению качества икры и в последствии к развитию аномалий у эмбриона (Детла и др., 1981; Пономарева и др., 2005в).
Таким образом, результаты исследований развития осетровых рыб в эмбриональном периоде свидетельствуют о повышении резистентности развивающихся эмбрионов и эффективности применения обработки витамином В., в период Подготовки икры к инкубации.
Однако следует отметить, что в наших исследованиях мы использовали самок стерляди, у которых был первый нерест, а для таких производителей характерно повышенное количество погибших эмбрионов и личинок (до 70-80 %). Поэтому использование биологически активных веществ в период нереста ведет к повышению выживаемости на ранних этапах онтогенеза.
в результате исследований разработаны новые биотехнологические методы выращивания ремонта и формирования высокопродуктивного маточного стада стерляди, предусматривающие сокращение сроков созревания производителей и длительности последующих половых циклов,